請務必在看完說明書以后進行操作，以正確的方式使用二氧化碳培養箱，以免造成因操作不當而損壞機器，如有疑問的可以聯系廠家。
1、接通電源前，先將箱內室用酒精擦凈，再用紫外滅菌燈或臭氧消毒器，消毒一小時。
2、在培養箱使用時需水箱注水才能正常工作。操作方法：插上電源，旋緊加水接頭，旋開溢水悶頭，將加水水管(用戶自備)接入箱體左側上部加水口，打開電源開關，此時蜂鳴器響，操作面板低水位指示燈亮，當注水**低水位燈滅，繼續注水**溢水口，水溢出。關閉電源，拆除接管及加水接頭。拉出放水管，放掉約100ml水后塞緊放水悶頭，關閉電源開關。
3、將二氧化碳專用減壓閥裝在二氧化碳鋼瓶上，白度儀接頭處不得有漏氣現象。將減壓閥輸出接頭套上耐壓用膠管，并與二氧化碳培養箱后的進氣接頭相連接，隨后用壓緊圈固緊，壓緊接頭處不得有漏氣。二氧化碳鋼瓶氣體總閥暫不打開。
4、開機
接通電源，總電源開關置“1”，電源接通指示燈亮。
將溫度設定值調到需要的溫度(例如37℃)，加熱指示燈OUT(綠)應亮，表示正在加熱。
將二氧化碳電磁閥開關置”0”(關閉電磁閥，因為在未使用二氧化碳培養箱時CO2氣體也未接通，電磁閥長期通電會發燙，影響其壽命)，隨后將CO2濃度設定為“0.0”。
待溫度達到設定值后，將二氧化碳鋼瓶開啟，(開啟前，減壓閥應盡量擰松，白度儀防止減壓閥輸出壓力過高導致輸氣管爆裂!)減壓閥上進氣壓力表指示鋼瓶內二氧化碳壓力，緩慢的順時針擰減壓閥旋鈕，使減壓閥輸出壓力指示為0.05Mpa，指針處于刻線中間。此時設定所需二氧化碳濃度(出廠時調整為0%),開啟二氧化碳進氣開關，置“1”，此時即有二氧化碳進入室內。隨著濃度升高，LED顯示出二氧化碳值，到設定值時電磁閥切斷，切換到空氣及二氧化碳補氣。此時空氣流量計浮子應指示在760ml/min(出廠時已調好)，二氧化碳流量計浮子應指示在40ml/min出廠時已調好);若浮子偏離上述數值時，可用調節針閥細調到760 ml/min(空氣) 及40ml/min(二氧化碳)準確為止。(在開門后快速恢復時，空氣無流量二氧化碳顯示值隨之變化，這是正常現象)。
出廠時流量計指示一般調整為5%±0.3%二氧化碳濃度
當溫度達到設定值，波動±0.5℃以內，二氧化碳濃度也達到要求后，即可進行細胞培養。放入水盤，使濕度符合要求，自然蒸發一般可達95%。
在**使用本機或較長一段時期停用后再使用，白度儀均應按上述要求操作，并且在正式培養前應作箱內污染檢查。
5、關機
關機前應將二氧化碳鋼瓶關閉，將二氧化碳進氣開關置“1”,然后切斷電源。若較長時間不用，則應將水盤取出，將箱內擦干，放盡水箱里的水。在二氧化碳開關置“0”狀態下，箱溫在37℃時通電兩小時保證箱內干燥后，再切斷電源。